食品中的微生物检测是食品安全检测的重要组成部分。由于环境中微生物的不可控性,使得食品从农场到生产加工及最终销售,从餐饮到半成品原料及成品熟食,各个环节都受到微生物污染的威胁。从全球范围来看,微生物污染是食品安全的最大威胁,全球大多数食品危害事件都源自于微生物的污染。
随着食品安全监管职能的政府机构改革的开展,我国的食品安全监管开始了从多头管理到统一管理,从终产品管理到全过程管理的转变,这就要求对于食品生产、流通的全过程进行快速、高效、准确的检测,尤其是能够快速应对突发的各种食品安全事件。 但是由于我国食品种类繁多,检测样本体量巨大,微生物的检测又需时较长,过程繁琐,不可控性较强,因此建立一个快速、高效的自动化检测平台就显得尤为重要。
自动化的食源性微生物检测平台能够缩短微生物检测的时间,减少人工操作,增强检测效率和准确度,提高大批量样本的检测能力和突发事件的应急能力,实现微生物检测的标准化。
PDF下载1、食品微生物检测流程
根据国内国际标准,对食品样品进行微生物的检测需要以下重要环节:
2、食品快速微生物检测平台
2.1 食品样本的前处理
固体样本的前处理
根据GB要求,固态食品微生物样品的前处理需要进行均质化和稀释,之后进行增菌和检测流程。
法国Interscience公司的均质器BagMixer和重量稀释仪BabyGravimat能够自动化的完成样本的均质和稀释,实现固态样本前处理的标准化操作。
均质器BagMixer 重量稀释仪BabyGravimat
液体样本的前处理
对于液态样本,根据GB要求,可采用薄膜过滤法进行处理。德国默克密理博公司的Milliflex-plus微生物限度检验系统是一种简单而快速的对液体样品进行微生物检验的方法,可用于检测瓶装水,啤酒,白酒,果汁和其他软饮料以及再生产过程中用到的液体原料。
Milliflex-plus
2.2 食源性致病菌的初筛
根据GB要求,在食品样品进行初步处理之后要经过预增菌和选择性增菌,通过培养筛选出样本中是否含有致病性微生物,然后对这些致病性微生物进行鉴定确认。在日常检测工作中,大部分的样品均为阴性样品,只有少量样品含有致病菌,也就是说,实际上致病微生物的筛选工作,占据了日常食品微生物检测工作的大部分时间和工作量。因此建立快速、高效、准确的自动化致病菌筛选平台,对于提高日常工作的效率,减少工作量,缩短检测时间,应对大量样本的检测和突发应急事件的快速反应显得尤为重要。
大通量病原体富集系统Pathatrix:
对于食品样品中一些含量低的病原菌和病毒,我们往往需要通过一定的富集手段才能检测到,病原体富集的富集可大大缩短我们增菌或病毒培养的时间,使我们占据检测时效的主动性。
美国Life Technologies公司推出的Pathatrix大通量全自动病原体富集系统采用独有的免疫磁珠分选专利技术,通过与磁珠表面包被的特异性抗体或阳离子结合,可实现一次性对多达10-60mL样品中目标细菌或病毒的捕获和纯化。该系统可范围应用于食品样品、环境样品、水样等。
Pathatrix
自动化快速筛选系统:
在对食品样品中的低含量病原菌进行富集之后,我们需要通过一定的筛选手段,区分出哪些样本中含有我们需要检测的目标微生物即阳性样本,哪些样本中不含我们需要检测的目标微生物即阴性样本。因为在实际工作中,大部分待检样本往往是阴性样本,而且阴性样本不需要进行后续的菌株分离、培养和鉴定工作,只有阳性样本才需要进行菌株的分离、培养和鉴定,因此,筛选工作实际上占据了我们日常检测工作中的大部分内容,一套自动化的快速病原菌筛选平台就显得尤为重要,可大大缩短我们的检测时间,提高我们的工作率。
法国生物梅里埃推出的VIDAS系统使用酶联免疫荧光技术,能够对食品、环境、水等各标本中的致病菌进行自动化快速筛选和毒素检测实验。
VIDAS
2.3 微生物的鉴定、快速鉴定及分子分型溯源能力
根据GB要求,食品样品通过培养筛选出的致病性微生物,必须进行鉴定确认。而微生物的鉴定由于操作复杂,对实验人员的技术水平要求较高,一直是微生物检测工作中的重点和难点。因此,目前自动化的微生物鉴定手段被各级微生物检测实验室广泛采用,这些自动化设备大大提高了鉴定工作的效率,节省了时间,提高了鉴定的准确性。
自动化的微生物染色系统:
革兰氏染色是微生物检测中不可获缺的重要实验,是微生物表型研究的基础,但是虽然这是一个基础的,简单的实验,但是却繁琐,且需要丰富的经验。为此,生物梅里埃推出了PREVI Color Gram 12全自动革兰染片仪。
PREVI Color Gram 12
自动化微生物鉴定系统:
在微生物的生化鉴定确认方面,生物梅里埃提供的API是全球细菌学鉴定的金标准。生物梅里埃在API的基础上不断发展,开发出了完全自动化的、操作非常简便的VITEK 2 Compact微生物鉴定及药敏系统,以适应客户不断提高的快速的,准确的,易于操作的要求。该套系统也是唯一受到我国食品微生物检测国家标准GB4789-2008推荐的一套系统。
VITEK 2 Compact
快速微生物质谱鉴定系统:
随着微生物鉴定需求的发展,对于一些日常微生物鉴定样本量较大的实验室,越来越需要一种能够高通量、低成本、快速的鉴定微生物的技术。生物梅里埃推出了利用生物质谱技术快速鉴定微生物的VITEK MS系统。
VITEK MS
微生物的分型溯源能力和病毒检测能力的分子生物学平台建设:
微生物的溯源是突发食品污染事件处理的重要手段,只有通过溯源找出真正的微生物污染来源,才能采取正确的处理措施,减少和避免事件的进一步危害。因此,建立食源性致病菌分子分型溯源能力是分析污染食品来源的技术保障。
当前,随着核糖体基因测序成为国际公认的微生物鉴定金标准和微生物鉴定的终极手段,微生物的鉴定已经由传统的生化鉴定走入了基因鉴定时代。更由于微生物种类的复杂性和微生物遗传的多变异性,基因分型技术在微生物的溯源领域得到应用。微生物基因分型溯源对于我们分析污染食品的来源具有至关重要的作用。因此需要我们建立基于基因水平的微生物分子鉴定和溯源平台。
美国Life Technologies公司的基于Sanger测序法的基因测序分析系统,广泛应用于全自动基因测序和基因片段分析、微生物鉴定,基因分型溯源分析以及转基因检测、真假物种鉴定等应用领域。并且Life Technologies公司还建立了全球唯一的、经过商业化认证的、基于核糖体DNA测序的细菌和真菌鉴定数据库。
MicroSEQ微生物鉴定系统
2.4 食品中微生物定量的标准化检测(卫生指标的检测)
食品微生物检测中,微生物的定量检测是评价食品安全风险和危害性的重要指标,属于食品微生物检测中的控制性指标。
目前传统的方法是菌落计数,因此菌落计数仪是必须配备的仪器。
菌落计数仪:
SCAN 1200 全自动菌落计数系统
全自动微生物定量分析系统:
虽然菌落计数仪在一定程度上减少了平板法数据重复性差,效率低下等问题,但操作依旧繁琐,操作过程也无法标准化,生物梅里埃推出了全球第一台基于经典方法的全自动食品微生物定量检测系统-Tempo。
Tempo
经过不断的发展,目前Tempo系统已经全面覆盖了卫生指标检测所要求的所有项目。包括了细菌总数计数,大肠菌群计数,大肠杆菌计数,葡萄球菌计数,及霉菌酵母菌计数等检测项目。并且这些项目都获得了AOAC、AFNOR等权威国际认证。
无菌食品的快速、自动化检测:
在我们的日常食品消费中,有些食品是要求在成品包装状态下处于无菌状态,否则会引起快速变质,如高温瞬时灭绝奶,果汁饮料等。但传统的无菌培养检测方法操作繁琐,尤其是耗时非常长。为此,生物梅里埃推出了BacT/ALERT 3D全自动细菌培养系统。